2-NBDG測(cè)定葡萄糖實(shí)驗(yàn)原理
基本信息：
2-NBDG是一種熒光標(biāo)記的2-脫氧葡萄糖類(lèi)似物，可用作細(xì)胞葡萄糖代謝的示蹤劑。當(dāng)它被細(xì)胞快速攝取入胞內(nèi)，攝取程度與其孵育濃度在一定范圍內(nèi)成正相關(guān)，此過(guò)程一定時(shí)間的熒光強(qiáng)度反應(yīng)了葡萄糖吸收的情況，以此作為探針來(lái)測(cè)定葡萄糖。
貨號(hào)：ajci4820
CAS：186689-07-6
分子式：C12H14N4O8
分子量：342.26
純度：＞98%
溶解：多羥基化合物，溶解性很好，能在水和乙醇，DMSO等有機(jī)溶劑中很好的溶解
| 存儲(chǔ)： | -20°C | 3 年 |
|---|---|---|
| 溶液： | -80°C | 6 月 |
| -20°C | 1 月 |
我司所提供的包裝及價(jià)格如下表：
| 包裝（需要更多包裝請(qǐng)咨詢(xún)） | 價(jià)格（￥） | 純度 | 庫(kù)存 | 購(gòu)買(mǎi) |
| 5mg | 450 | ＞98% | 現(xiàn)貨 | 購(gòu)買(mǎi)2-NBDG點(diǎn)擊此鏈接 |
| 10mg | 850 | ＞98% | 現(xiàn)貨 | |
| 100mg | 7500 | ＞98% | 現(xiàn)貨 |
2-NBDG結(jié)構(gòu)式：
監(jiān)測(cè)活細(xì)胞中的葡萄糖攝取原理：
葡萄糖是一種六碳單糖，通常以游離、結(jié)合的形式，存在于動(dòng)植物體內(nèi).正常人血漿中葡萄糖含量在3.89~6.11mmol/L之間，尿液中一般不含游離葡萄糖，糖尿病患者尿中的含量變化比較大。葡萄糖是維持細(xì)胞活動(dòng)和組織內(nèi)穩(wěn)態(tài)所必需的能量來(lái)源。糖代謝是許多疾病的重要靶點(diǎn)，并隨著病理?xiàng)l件的改變而改變，因此，糖代謝的評(píng)價(jià)可以作為疾病進(jìn)展的重要指標(biāo)。
2-NBDG是一種熒光標(biāo)記的2-脫氧葡萄糖類(lèi)似物，所謂的類(lèi)似是指與D型葡萄糖（D-glucose）具有相同的轉(zhuǎn)運(yùn)體（GLUTs）和類(lèi)似的胞內(nèi)代謝方式，兩者之間存在競(jìng)爭(zhēng)性抑制，可用作細(xì)胞葡萄糖代謝的示蹤劑，與同位素示蹤相比，其無(wú)輻射損傷，具有檢測(cè)方便，分辨率高等優(yōu)點(diǎn)。當(dāng)它被細(xì)胞吸收以后，熒光強(qiáng)度反應(yīng)了葡萄糖吸收的情況，以此作為探針來(lái)測(cè)定葡萄糖攝取能力，也是判斷細(xì)胞活力的指標(biāo)之一，也可用于糖代謝疾病藥物的評(píng)估與篩選。
2-NBDG可用于體外多種細(xì)胞，如HepG2人肝癌細(xì)胞、L6大鼠骨骼肌細(xì)胞、MCF-7乳腺癌上皮細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞，也可用于疾病模型、癲癇大鼠、高血糖、糖尿病或小鼠異種移植瘤模型。
2-NBDG的最大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)為475/550nm，通過(guò)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白進(jìn)入細(xì)胞，隨后被己糖激酶磷酸化并被困在細(xì)胞內(nèi)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)（FL1通道）細(xì)胞產(chǎn)生的熒光，檢測(cè)細(xì)胞對(duì)2-NBDG的攝取，熒光微孔板法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)的2-NBDG濃度。它也可以用熒光成像顯微鏡（熒光素濾片F(xiàn)ITC）或CCD攝像機(jī)進(jìn)行檢測(cè)。
2-nbdg測(cè)定葡萄糖實(shí)驗(yàn)步驟：
1.配置一定濃度的儲(chǔ)備液：用水或者DMSO溶解，2-NBDG溶解和葡萄糖類(lèi)似，在水里的溶解度比較高(＞17.1mg/mL)，可以使用我司溶液配制計(jì)算器計(jì)算，以移液槍取用方便為原則，自行設(shè)置儲(chǔ)備液濃度，配置好的溶液置于-80℃冰箱里，有效期約半年。
2.向每組細(xì)胞中加入100μM的2-NBDG（注：加入2-NBDG后可用培養(yǎng)基稀釋到100um），然后將細(xì)胞在37℃下孵育1小時(shí)，用PBS洗滌三次，最后在熒光顯微鏡下觀察，檢測(cè)熒光強(qiáng)度。[1]此階段實(shí)驗(yàn)一般設(shè)置不同的對(duì)照試驗(yàn)，如加入藥物刺激的實(shí)驗(yàn)組。
參考文獻(xiàn)：
1.Free Radical Biology and Medicine.j.freeradbiomed.2022.09.029.DOI:10.1016/j.freeradbiomed.2022.09.029
恭喜以下科學(xué)家使用我司2-NBDG發(fā)表文章：
1.Hindawi.Oxidative Medicine and Cellular Longevity.Volume 2022, Article ID 9148257, 24 pages
2.J. Agric. Food Chem. 2021, 69, 13838-13848
3.Free Radical Biology and Medicine.j.freeradbiomed.2022.09.029
4.Basic & Clinical Medicine.Vol.42 No.11.November 2022
5.Cancer Cell International volume 22, Article number: 143 (2022)
7.Biophysics Reports, 2023, 9(3): 134-145.2-NBDG,purchased from Amgicam.DOI:10.52601/bpr.2023.230003
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更多參考文獻(xiàn)：
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[3]. Tsytsarev V, Maslov K I, Yao J, et al. In vivo imaging of epileptic activity using 2-NBDG, a fluorescent deoxyglucose analog[J]. Journal of neuroscience methods, 2012, 203(1): 136-140.
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[5]. Vassiliy Tsytsareva,b,1,2, Konstantin I. Maslova,1,3, Junjie Yaoa,1,3, et al, In vivo imaging of epileptic activity using 2-NBDG, a fluorescent deoxyglucose analog, J Neurosci Met
